我们知道，elisa的每项步骤都进行完善优化后，让实验达到状态也是必然的事了。那么关于elisa包被条件如何优化呢？上海沪鼎给您一个的答案:
1.包被抗原的选择
包被抗原可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类。天然蛋白需经纯化 才能用直接吸附法包被，对于含杂质较多的抗原可以采 用间接捕获法包被(先用能 够与目的抗原反应的物质如抗体直接吸附在酶标板上，再通过特异性反应使抗原固 相化)。经纯化的重组蛋白一般皆可直接包板。小分子 抗原比如多肽以及一些小分 子有机化合物，由于分子量太小，往往难于直接吸附在酶标板上，一般都先使其与 无关蛋白质如bsa等偶联，偶联物吸附于固相载体上。
2.包被液的选择
一般常用的是ph9.6的碳酸盐缓冲液，如果包被的抗原在碱性条件下不稳定的话 ，也可以使用ph7.2的磷酸 盐缓冲液。
3.包被温度的选择
通常是4-8度条件下过夜或者37度保温2小时，我们强烈建议4-8度条件下包被， 有利于蛋白活性的保 持。
4.包被浓度的选择
包被的zui适浓度随固相载体和包被物的性质变化，一般蛋白质的包被浓度为1- 5ug/ml，要明确针对特定包 被抗原的zui适包被浓度需要通过实验来确定。
另外还有一个相关重点问题值得讨论，包板后需要封闭吗？应该选择什么样的 封闭体系？上海沪鼎技术员特别说明：封闭是否必要，取决于elisa的模式及具体的 实验条件。一般说来，双抗体夹心法，只要酶标记物是高活性的，操作时洗涤* ，不经封闭也可得到满意的结果。而在间接法测定中，封闭一般是*的。
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