ccd841 con 人正常结肠上皮细胞（有限细胞系）
,ccd841 con
货号：yj-h322（str鉴定）
价格： 5000.0
规格： 1*10 6
细胞介绍
ccd 841 con (atcc crl-1790) 细胞是拉伸的上皮样细胞，在培养中生长为扁平且杂乱无章的层。可以观察到一些圆形细胞堆积在附着的群体上，碎片中等至重。crl-1790 是一种正常的人类二倍体细胞系，因此它最终会衰老。人口倍增水平 (pdl) 信息可在特定批次的分析证书上找到，并可在 atcc 网站上找到。
细胞特性
1）来源：女性 大肠
2）形态：上皮细胞样，贴壁生长(贴壁弱，消化时间短，时间过长会导致细胞不长)
3）含量：>1x10^6 细胞数
4）规格：t25瓶或者1ml冻存管包装
5）用途：仅供科研使用。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1ml冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）t25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将t25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5x显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8ml，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议t25培养瓶1：2传代 。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备dmem 基础培养基 (yj-0001)，特级胎牛血清10 % p/s 1%
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。换液频率：隔天换液。
3）冻存液：90%fbs，10%dmso，现用现配。
注意：
1.细胞经过运输后，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，1000rpm(约150g)离心3-5min，弃上清。加5ml pbs重悬细胞，再1000rpm(约150g)离心3-5min，用新鲜的完全培养基重悬接种到新的培养瓶。第二次pbs重悬是为了去除碎片，如果平时碎片比较少，传代时可以省略pbs重悬的步骤；如果碎片很多，建议pbs多洗几次。
2.细胞生长不均时，可以将细胞消化吹散后加入新的培养基重新接种或传代。
细胞生长缓慢时，可以选择更换优质胎牛血清或者提高血清浓度（最高不超过20%）培养，也可以根据细胞生长状态，选择传代细胞到新的培养瓶中继续培养。
二．细胞处理：
1）冻存细胞的复苏：
将含有1ml细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6ml完全培养基的离心管中混合均匀。在1000rpm条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的pbs润洗细胞1-2次。
2.加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mm edta于培养瓶中（t25瓶1-2ml，置于37℃培养箱中消化1分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，具体以细胞消化到相互分离但未脱落，轻敲几下可以下来为准，严禁消化到细胞完全漂浮，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%fbs的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出，在1000rpm条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2ml培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新t25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面t25瓶为例；
1.细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2.1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3.将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
注意事项
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
5.客户在细胞培养过程中，有技术问题可以联系咨询技术售后，我们随时给予解答。
从2011年开始我们致力于在生命科学领域、生物医学实验外包及论文润色服务，协助客户各类实验服务及论文润色十余年，是客户您值得信赖的科研合作伙伴!
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