倒置荧光显微镜使用常见问题和解决方法介绍

发布时间:2024-05-18
倒置荧光显微镜是细胞培养、细胞转染和很多生物研究中常用的仪器,相比共聚焦显微镜,倒置荧光显微镜的成像精度虽然稍低,但仪器更普及,更容易买到或者约到,而且使用维护都更简单点。今天我们就给大家分享下倒置荧光显微镜使用可能遇到的常见问题,以及可能的解决办法。
什么是倒置荧光显微镜
倒置荧光显微镜由倒置显微镜和落射荧光模块组成,倒置显微镜是相对正置显微镜的概念,其物镜、照明系统相对样品的位置是颠倒的;落射荧光模块是荧光观察的核心部件,有转盘式荧光模块和集成荧光模块两种,转盘式后期可升级,但需要独立的荧光光源灯箱,用转盘式模块的倒置荧光显微镜更大、更重、更贵。
为什么要用倒置荧光显微镜
倒置荧光显微镜通常z高只会配40x物镜,因此放大倍率、分辨率不如正置荧光显微镜,但胜在应用层面更方便好用。
一是、倒置荧光显微镜的物镜有更长工具距离,可以适配各种培养皿从底部直接成像,从而节省了反复制样做玻片的麻烦,效率更高更适合大批量、多视野培养细胞等样品的观察。
二是、倒置荧光显微镜可以无沾染观察,无沾染意思是因为观察无需打开培养皿,可避免取样制样带来的沾染污染风险。
三是、倒置荧光显微镜的优势是更大的工作空间,因为倒置荧光显微的明场照明系统采用的是长工作距离聚光镜,因此载物台上方有更大空间,更方便安装使用显微操作系统等配件。
倒置荧光显微镜通常可以实现明场、相衬和荧光观察,如果仪器附近有贴sop或者说明书,可以看看,快速上手。明场观察很简单,可以看病理切片等样品,这里不赘述;相衬观察需要切换到相衬物镜,然后把上光源光强调高,聚光镜光阑调到php位置(最大位置),切换相衬环板到对应的位置即可;难点是荧光观察,不同倒置荧光显微镜有不同结构,大致可以分为研究级倒置荧光显微镜和新型倒置荧光显微镜两种。
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