可能的原因及对应的解决方案如下：
酶失活或在反应体系中未加入酶。taq dna 聚合酶因保存或运输不当而失活，往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。
模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，造成 dna 脱嘌呤而影响 pcr 的结果。
变性温度是否准确：pcr 仪指示温度与实际温度是否相符，过高酶在前几个循环就迅速失活；过低则模板变性不底。
反应系统中污染了蛋白酶及核酸酶，应在未加 taq 酶以前，将反应体系 95℃ 加热 5~10 分钟。
引物变质失效。人工合成的引物是否正确。是否纯化，或因储存条件不当而失活。
引物错误。利用 blast 检查引物特异性或重新设计引物。
dna 凝胶电泳时加入阳性对照，确保不是 dna 凝胶和 pcr 程序的问题。