高压蒸汽灭菌器主要用于科研、大学、非医用目的医疗实验室、制药工业、生物科技、食品工业和化学工业实验室，耐高温、高压蒸汽的固态物如器皿、工具等的灭菌、培养基以及非封闭液体等的灭菌、保温。高压蒸汽灭菌器操作步骤：
1．首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。
2．放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。
3．加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。
4．打开电源加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。
5．灭菌所需时间到后，切断电源或关闭煤气，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0之后，再打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。