在使用预真空压力蒸汽灭菌器灭菌前，要做好以下工作，方能使预真空蒸汽灭菌器的功能发挥到较佳，使灭菌效果得到明显体现。
1、灭菌物品的装载灭菌物品的包装不宜过大过紧，包外必须有明显的标记，注明名称、日期、责任人，包内必须放置化学指示卡，包外粘贴化学指示胶带。
2、预真空型压力蒸汽灭菌器应在每日开始灭菌运行前，进行空载的b-d试验测试灭菌器真空系统的有效性，b-d测试合格后灭菌器方可使用。
3、预真空型压力蒸汽灭菌器内空气的排除压力蒸汽灭菌的成败与否，取决于时间、温度、压力的三同步，压力蒸汽灭菌器内蒸汽温度不仅和压力有关，并且和蒸汽饱和度有关。蒸汽达不到饱和，即使灭菌器达到规定压力也达不到规定灭菌温度。
4、控制加热速度采用热压蒸汽灭菌，开始升温时需要一定的预热时间，如果加热太快,灭菌物品表面很快达到规定温度，其内部尚未达到规定温度，易造成灭菌不彻底。应控制加热速度，使灭菌器内温度逐渐上升，灭菌物品内外温度一致。
5、操作前安全检查每次设备运行前应对灭菌器进行全面检查，检查安全阀、压力表、温度表是否正常，打印装置处于备用状态，灭菌器柜门密封圈是否平整无损坏，柜门安全电锁扣是否灵活有效，电源、水源、蒸汽、压缩空气等运行条件符号设备要求时方可使用。