ELISA试验操作中留意事项总结

发布时间:2024-05-08
因为 elisa(酶联免疫试验)具有灵敏度较高、特异性好的特色,在科研范畴遭到广泛喜爱。虽然洗板仅仅elisa试剂盒试验重要环节中的一个,但作为专业的洗板机生产厂家,我们有必要对影响elisa试验成果各要素有一定的知道。的试剂 ,良好的仪器和正确的操作是确保elisa 检测成果牢靠的必要条件。如不留意,就易呈现白板、花板、色弱和假阳性等现象。尤其是花板现象(就是空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔成果正常,而标本孔的od值却显着偏高)是各个厂家洗板机调试中常常遇到的问题。现将elisa试验操作中留意事项总结如下,以期给大家带来一些启发。
标本及收集、贮运要素
严峻溶血 ,以 hrp 为符号的elisa 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色形成假阳性; 混有红细胞的血清 易沉积或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有 细菌污染 ,菌体中或许含有内源性hrp,也会发生假阳性反应; 标本凝结不全 ,有时为了争取时刻快速检测,常在血液还未开端凝结时即强行离心别离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在elisa测定过程中能够形成肉眼可见的纤维蛋白块,易形成假阳性成果; 采血试管洗刷不* 、重复运用易穿插污染; 塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降形成假阴性。

血清标本宜在新鲜时检测,严峻溶血标本禁用。一般说来,在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时刻过长导致血清igg 聚合,使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻住血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免发生气泡。混浊或有沉积的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。重复冻融会使 抗体 效价跌落,所以测 抗体 的血清标本如需保存作屡次检测,宜少数分装冰存;应该运用一次性玻璃试管或真空管*;并运用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会添加od值,或许与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶符号物不易洗脱有关;edta、酶抑制剂(如nan3)可抑制elisa体系中辣根过氧化物酶活性;血液标本收集后有必要使其充分凝结后再别离血清,或标本收集时用带别离胶的*或于*中加入恰当的促凝剂。
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