血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等,其间蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种,是细胞合成蛋白质的基本成分,其间有些氨基酸动物细胞自身不能合成,必定要由培养液提供。
血清激素有胰岛素、成长激素等及多种成长因子(如表皮成长因子、成纤维细胞成长因子、类胰岛素成长因子等)血清还含有多种不知道的促细胞成长因子、促贴附因子及其他活性物质,能促进细胞的成长、增殖和贴附。
因而,细胞培养时,要确保细胞能够顺畅成长和增殖,一般需增加百分之十到百分之二十的血清,动物血清还可起到酸碱度缓冲液的效果。
怎么冻结血清才不会使它的质量受损呢?
首先将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8c冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必定要注意的是,溶解进程中必定要规矩地摇晃均匀以防止沉淀物的产生!小编下面就来具体介绍下办法和过程:
防止产生沉淀物的办法:
1、冻结血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
2、冻结血清时,请依照所建议的逐步冻结法(-2℃至4℃至室温),若血清冻结时改动的温度太大(如-20℃至37℃),试验显现非常简单产生沉淀物。
3、请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因而受到危害,而影响血清的质量。
4、血清的热灭活非常简单形成沉淀物的增多,若非必要,能够无须做此过程。
5、若必定要做血清的热灭活,请恪守56℃,30分钟的准则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会形成沉淀物的增多。
血清冻结后发现有絮状沉淀物呈现,该怎么处理?欲去除这些絮状沉淀物,能够将血清分装至无菌离心管内,以400g略微离心,上清液即可接着参加培养基内一同过滤。但不建议以过滤的办法去除这些絮状沉淀物,由于它可能会阻塞过滤膜。