人tuberculin elisa试剂盒操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入pbs 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加tmb显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,终测得的od值为两者之差(w1-w2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(s)和阴性对照(n)的 od值后,计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。
aesgp130结合蛋白gam抗体
amhr2缪勒激素2型受体抗体
actr1激活素受体1a抗体
actr2激活素受体2a抗体
activin receptor type iib激活素受体2b抗体
c2orf88 2号染色体开放阅读框88抗体
arhgef18g蛋白偶联受体arhgef18抗体
activin a receptor type ib激活素受体1b抗体
ara24雄激素受体相关蛋白24抗体
amyloid precursor protein淀粉样肽前体蛋白抗体(c端)
adcy2腺苷酸环化酶2抗体
apoc3载脂蛋白c3抗体
apolipoprotein e4载脂蛋白e4抗体
ambra1自噬相关基因ambra1抗体
phospho-atg4c(ser177)磷酸化自噬相关蛋白4c抗体
phospho-atg4c(ser398)磷酸化自噬相关蛋白4c抗体
phospho-ask1 (ser966)磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
phospho-atxn1 (ser775)磷酸化失调症蛋白1抗体
atxn1/ataxin-1脊髓小脑失调症蛋白1抗体
phospho-amyloid precursor protein (thr668)磷酸化app淀粉样肽前体蛋白抗体
phospho-ask1 (ser967)磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
phospho-ask1 (thr845)磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体
phospho-atf2 (thr69/71)磷酸化活化复制因子2抗体
phospho-atp1a1 (tyr10)磷酸化钠钾atp酶蛋白a1抗体
phospho-atp1a1 (ser16)磷酸化钠钾atp酶蛋白a1抗体
phospho-ack1 (tyr859 + 860)磷酸化ack1抗体
phospho-ampk alpha-1(ser485+ser491)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体
phospho-ampk beta 1 (ser108)磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体
关键词:培养箱