RPASMC细胞传代(鼠肺动脉平滑肌细胞)

发布时间:2024-04-01
细胞:rpasmc细胞
中文名称:鼠肺动脉平滑肌细胞
生长特性:贴壁细胞
来源:sciencell细胞库
培养基:dmem-h培养基 血清:10%fbs(gibco胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% fbs、10% dmso
rpasmc细胞传代:
1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,pbs缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25%yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。
2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。
3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4):注意培养基ph值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)
腺苷对博莱霉所致肺纤维化以及脾与骨髓等基质细胞实验:
目的应用双哌达莫(dpm)、腺苷(ado)与ado拮抗剂(th)治疗(ble)肺纤维化小鼠,观察肺、脾等病理变化,探讨肺纤维化发病机理.
方法:
实验第1天100只小鼠经气管注入ble 8.5 mg*kg-1,随机分ble、dpm、ado和th四组;
第2天起分别给予ns(100μl*d-1)、dpm、ado和th,剂量均为50mg*kg-1*d-1,共7天;
第4~30天内chu死动物,组织化学法观察肺内纤维变化与脾、胸腺、骨髓病理学改变.
结果:
ble组和th组第4~6天脾、胸腺髓质与骨髓中许多基质细胞huai死导致组织严重疏松。
ble组第20天后脾与胸腺逐渐weisuo,肺与脾内网状纤维大量增加。
dpm组与ado组第4~6天脾、骨髓坏死基质细胞较少,第30天肺未发生纤维化,淋巴器官未weisuo.
结论:
ble能致脾、骨髓等基质细胞大量huai死与严重组织疏松.内、外源性ado能轻度减少基质细胞huai死,促进淋巴组织与造血组织增生,抑制ble诱导的肺纤维化与淋巴器官weisuo.
关键词:培养箱
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