用hitachi cr—g离心机,r10h转头分离pcr后(dna或其他生物大分子)样品
a液:20%peg6000,2.5m nacl 及isopropanol (异丙醇)
分离步骤:
1.用384孔板或96孔板,按比例增加容量,在pcr仪中扩增反应后
2.每孔内含10ul pcr后样品及10ul a液
3.微板先用摇床充分混匀。
4.对称加入p10h转头(二块或四块,384孔板)
5.离心10,000rpm(约13,000xg)×10分,4℃,加速“9”,减速“9”
6.取出微孔板
7.用kimtowels 纸贴在r10转头放微板架的内壁
8.去掉微板盖并把微板倒过来放入r10h 转头微板架。
9.预置转速1000rpm,10分,4℃,加速“9”,减速“9”,在速度显示到达300rpm时停车。
10.从微板中取出转头,沉淀可作出进一步实验。
特点:1. 转速高(一般微板转头都在5000rpm,4000xg以下)回收率高。
2. 沉淀紧,反向低速离心后上清全部被纸吸干。
3. 用于dna测序前样品制备最合适。
离心机