增强型蓝色荧光蛋白(ebfp)
在光谱的另一端是蓝色/蓝绿色变体,包括增强型蓝色荧光蛋白(ebfp)变体。激发波长和发射波长分别为380nm和440nm。由于这些突变改进了蛋白折叠和发色团形成的效率,所以也增强了所发出荧光的亮度(与蓝色变体相比)和蛋白溶解性。但不足之处,就是ebfp产生的荧光信号大致与wtgfp相当。蓝色荧光蛋白发光较弱,抗光漂白和抗酸性较差,用于细胞成像时背景信号高。针对ebfp开发的3个亮的突变体:azurite (亮度是ebfp的1.6 倍)、ebfp2(亮度是ebfp的2倍,mtagbfp(亮度是ebfp的3.7倍)。最亮的蓝色荧光蛋白。mtagbfp 是由红色荧光蛋白tagrfp突变而来。
将野生型的gfp的tyr66替换为his,使用咪唑基取代原本的酚基。这一突变使得激发与发射光谱相对于原本gfp发生蓝移(激发波长:383 nm,发射波长:445 nm)。并且将val150突变为lle、增强发光基团的稳定性。
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以上资料来自小编msq,2023.09.25
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