猪轮状病毒a组（prv-a）核酸检测试剂盒组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 u/l，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 u/l，100 u/l，50 u/l，25 u/l，12.5 u/l，6.25 u/l，3.12 u/l，样品稀释液直接作为空白孔 0 u/l。如配制100 u/l标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 u/l的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液a：1×10ml。
5、 检测稀释液b：1×10ml。
使用及效果：
pcr反应特点
(1) 特异性强
pcr反应的特异性决定因素为：
①引物与模板dna特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③taq dna聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及taq dna聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
pcr产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，pcr的灵敏度可达3个rfu(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
pcr反应用耐高温的taq dna聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在dna扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，dna 粗制品及总rna均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活pcr技术概论。