反应氧自由基(ros)是一类化学活性的含氧分子,它们是细胞代谢的副产物。在生理条件下,ros水平受到精准的调节,在正常细胞信号转导、细胞周期、基因表达和稳态中作为信使发挥作用。
当ros生成过量时,有可能引起一系列有害事件。在高浓度下,ros会诱导细胞内氧化应激反应,导致细胞大分子如核酸、膜脂和细胞蛋白等的损伤。这些生物大分子的氧化损伤会触发细胞凋亡,与衰老有关,并被认为是各种疾病、癌症和神经退行性疾病、糖尿病以及炎症的发病机制之一。下图是ros的产生过程。
dcfh-da
dcfh-da,是一种活性氧检测试剂。它是2',7'-二氯荧光二乙酸酯的衍生物,可以进入细胞内,在那里它被脱乙酰化为非极性的、不带电荷的2',7'-二氯荧光素(dcfh)。dcfh可以通过氧化作用被ros氧化为高度荧光的2',7'-二氯荧光素(dcf)。因此,dcfh-da可以用于测量ros水平的变化,从而评估细胞内氧化应激的程度。
”increased oxidative stress contributes to impaired peripheral cd56dimcd57+ nk cells from patients with systemic lupus erythematosus“这是一篇使用我们的dcfh-da(#15204)发表的影响因子为4.6的文献,文中使用10µm的dcfh-da与细胞孵育,并使用流式细胞仪进行检测。
图示:外周cd56dimcd57+ nk细胞在sle患者中表现出更高的氧化应激。a gsea图显示,在狼疮nk细胞中ros信号(富集图:hallmark_reactive_oxygen_species_pathway)增加,与正常nk细胞(gse63829)相比。b sle患者(n = 14)和hc(n = 8)中cd56dimcd57+ nk细胞产生ros的情况。c sle患者(n = 14)和hc(n = 11)中cd56dimcd57+ nk细胞产生mtros的情况。d gsea图显示,在cd57 + nk细胞中ros信号(富集图:hallmark_reactive_oxygen_species_pathway)增加,与cd57-nk细胞(gse23695)相比。e 比较sle患者(n = 14)中cd56dimcd57+ nk细胞亚群和cd56dimcd57− nk细胞亚群的ros水平。f 比较sle患者(n = 14)中cd56dimcd57+ nk细胞亚群和cd56dimcd57− nk细胞亚群的mtros水平。g sle患者(n = 14)中cd56dimcd57+ nk细胞亚群中ros水平与穿孔素表达的相关性。h sle患者(n = 14)中cd56dimcd57+ nk细胞亚群中ros水平与总细胞凋亡的相关性。i hc中cd56dimcd57+ nk细胞亚群和cd56dimcd57− nk细胞亚群暴露于20µm、40µm和80µm h2o2 24小时培养后的细胞凋亡水平比较(n = 5)。gsea:基因集富集分析;ros:反应性氧化物;mtros:线粒体反应性氧化物。 (* p<0.05,** p <0.01,*** p <0.001) 文献链接:increased oxidative stress contributes to impaired peripheral cd56dimcd57+ nk cells from patients with systemic lupus erythematosus
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关键词:流式细胞仪