详谈ELISA试剂盒HRP底物分类

发布时间:2024-03-16
elisa试剂盒灵敏性判断的话,因为各种elisa试剂盒的机能之间没有明显的水平差异,但是在inbios试剂盒检测到的数据体现愈甚的原尺度低(p / n <10)以及介质(10≤p / n <20)cdc jev igm抗体阳性标本的xcyton套件。不乱性包含长期不乱性,开盖不乱性,运输不乱性,有必要还要添加热加速不乱性等。拿核酸类试剂来说,敏捷度有的时候叫*低检测线,就是拿一个已知浓度样本稀释下去,直到试剂盒检测不出来为止,从而得到该试剂盒敏捷度到什么程度,特异性就是用该试剂盒检测与目的病原微生物在相同感染部位的阴性样本,检测试剂盒是否泛起假阳性结果,精密型比较简朴,检测一份接近但高于*低检测线样本重复十次,计算cv值,一般核酸类试剂要求小于5%,酶免不清晰。 假如要判定elisa试剂盒的敏捷度,样品应该着眼于四周的疾病预防控制中央的数据为根据,对试剂盒的敏捷度进行了分析,通过对比套件结果与cdc日本脑炎病毒igm抗体阳性的结果,以及从疾病的发病样品采集的天数分类,有着明显的机能差异。通过试剂盒的检测结果与cdc日本脑炎病毒igm抗体阳性的结果进行了对比确定的尺度:分为低、中、高,其主要依据是看比例。
底物范围较广,包括二氨基联苯胺(dab)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。hrp底物范围较广,包括二氨基联苯胺(dab)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。
一、二氨基联苯胺/金属盐
dab是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在dab中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色,且在水及醇中稳定。dab/金属盐染色应用的组织染色范围较广。
1. 需要的溶液和特殊设备
dab,0.05 mol/ltris缓冲液(ph7.6),0.3% (w/v) 氯化镍/水贮存液,30%过氧化氢,dpx,光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果).
2. 操作步骤
(1) 用 9 ml 0.05 mol/l tris缓冲液(ph7.6)溶解6 mg dab;
(2) 加 l ml 0.3%(w/v)氯化镍/水贮存液(也可以用等量的氯化钴替代);
(3) 加0.1 ml 3%过氧化氢。过氧化氢一般以30%的溶液提供,贮存在4 ℃,此条件可以持续1个月;
(4) 如果出现沉淀,用滤纸过滤;
(5) 加此溶液至标本,并孵育1~20 min水洗终止反应;
(6) 优化:如果需要可复染;
(7) 用dpx封片。
二、氯萘酚
氯萘酚可以形成一种蓝黑色产物。敏感性低于dab,且产物可溶于醇中。它适用于当dab反应形成较高背景或要求改变产物的颜色。
1. 需要的溶液和特殊设备
0.03%氯萘酚,用无水乙醇溶解(贮存在-20℃),0.05 mol/ltris(ph7.6),过氧化氢,gelvatol或者mowiol,光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果)。
2. 操作步骤
(1) 氯萘酚贮存液的准备:用10 ml无水乙醇溶解0.3 g氯萘酚,贮存于-20℃;
(2) 加100μl 氯萘酚贮存液至10 ml 0.05 mol/ltris(ph7.6);
(3) 加0.1 ml 3%过氧化氢于水中。过氧化氢一般是以30%的溶液提供,4℃可存放1个月;
(4) 白色沉淀可用滤纸过滤去除;
(5) 加此溶液到标本中,并在室温孵育10~40 min,水洗终止反应;
(6) 优化:如果需要,进行复染,但只可使用水溶性染料;
(7) 用gelvatol或者mowiol封片。
三、氨乙基咔唑
氨乙基咔唑(aec)产生红色产物,其敏感性低于dab,但可用于dab反应产生较高背景或要求改变产物颜色的实验。此产物可溶于醇,但不溶于水。
1. 需要的溶液和特殊设备
0.4% aec用 n,n—二甲基甲酰胺(dmf)溶解, 0.1 mol/l乙酸钠缓冲液(ph5.2),过氧化氢, gelvatol或mowiol,光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果)。
2. 操作步骤
(1) 用 l ml dmf溶解 4 mg aec。aec在dmf中稳定,因此,可以用100 ml dmf溶解0.4 g aec作为贮存液备用;
(2) 加 l ml aec溶液至15 ml 0.1 mol/l的乙酸钠缓冲液(ph5.2)中,并搅拌;
(3) 加0.15 ml 3%过氧化氢于水中。过氧化氢一般是30%的溶液提供,在4℃可存放1个月;
(4) 用滤纸过滤;
(5) 加此溶液到标本中,并于室温孵育10~40 min,水洗终止反应;
(6) 优化:如果需要复染,只可用水溶性染料;
(7) 用gelvatol或mowiol封片。
上一个:北方盆栽金橘制作管理技术
下一个:qcy耳机怎么样啊(qcy蓝牙耳机质量好吗)

0402 560pF -50V贴片电容
压力变送器接线图
邮箱已到期或该账户不允许登录我们分配账号登录出现这个是什么意
离婚孩子是怎么判的
mt6765处理器有哪些手机(mt6765性能真的很差吗)
w1跟h1(w1与h1芯片差的多吗)
小户赛香气如何武装到牙齿?简介品茗感受
喝枸杞菊花茶护眼原料有讲究
养兰古诀
万网轻云服务器价格