1．酶标抗抗体工作浓度的选择
（1）用100ng/ml人igg进行包被，洗涤。
（2）将酶标抗人igg用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中，保温、洗涤。
（3）加底物显色。加酸终止反应后，读取吸亮度（a），绘制曲线如图15-10。读取a值在1.0时的酶标抗体稀释度，作为酶标抗体的工作浓度。该酶标抗人igg的工作浓度应为1/1600。
2．棋盘滴定法选择包被抗原工作浓度
（1）用包被液将抗原作一系列稀释后进行包被，洗涤。
（2）将强阳性参考血清、弱阳性参考血清和阴性参考血清用稀释液作1:100稀释，加样，保温，洗涤。
（3）加按工作浓度稀释的酶标抗人igg抗体，保温，洗涤。
（4）加底物显色。加酸终止反应后读取a值。
（5）选择强阳性参考血清的a值为0.8左右、阴性参考血清的a值小于0.1的包被抗的的稀释度作为工作浓度。表15-1为本例的测定结果，表中数字为a值。从表中可见1:200为zui舒适的工作浓度。