hplc 柱前衍生法分析 b1
（aft）对有机体具有致突、致癌、致畸性，被列为可能的人体致癌物质。 在多种人类食物中被发现，如玉米、坚果、花生等等，以 b1、b2、g1、g2 的形式存在。aftb1 在动物体内可转变成两 种主要代谢产物- aftm1 和 aftq ,前者的毒 性和致癌性与aftb1相近,主要存在于动物 的尿和乳汁中。
可使用正相和反相液相色谱法分离，反相色谱法操作较容易、流动相毒性也较低，被广泛采用。使用反相液相色谱检测时，可通过柱前衍生法或柱后衍生法，提高aftb1 、aftg1的检 测灵敏度 ，使之与 aftb2、aftg2 在相近水平下检测。柱前衍生法柱前衍生，hplc 检测 b1。该方法可用于 4 种 b1、b2、g1、g2 同时检测，也可用于 aftm1 检测。
样品前处理
取 50μl b1 标样溶 液 (10ng/ml，溶剂溶液(98:2 v/v))，混匀1min，室温下放置10min，氮气吹干，用乙腈水溶液(乙腈/水 85：15 v/v) 50μl重新溶 解，混匀30s，经0.45μm滤膜过滤，供液相色谱仪检测用。
■ lc 分析条件
仪器：shimadzu lc-20a 液相色谱系统（含 lc-20at 二元泵、cto-20a 柱温箱，rf-10axl荧光检测器，lcsolution 色谱工作站）
色谱分析条件
流动相：甲醇:乙腈:水=1:3:6
流速 ：1.0ml/min
色谱柱：shim-pack gvp-ods (4.6mm*10mm)；
shim-pack vp-ods (4.6mm*150mm,5μm) 激发波长 365nm
发射波长 425nm 柱温：40℃ 进样量：10μl
■ 分析结果
b1（aftb1）标样色谱图及分析结果
表 1 b1 分析结果
化合物
标样浓度
(ng/ml)
保留时间
(min)
峰面积
峰高
aftb1
衍生
10
3.368
329246
37098
aftb1
未衍生
10
6.721
12685
1024
■ 结论
三柱前衍生法可用于 aftb1 检测，增强其荧光强度，提高检测灵敏度。通过以上实验检测 aftb1 标样（10ng/ml），未经衍生标液的信噪比为 42，衍生后信噪比提高至s/n=1434