akta蛋白纯化系统的一般操作：
1、开机
按位于底部平台前左侧的on/off 按钮，打开色谱系统，然后打开电脑电源。待仪器自检完毕（cu950上面的3个指示灯*点亮并不闪烁）。双击桌面上unicorn图标，进入操作界面。unicorn的操作界面分为四个窗口（fig 3）
fig 3、unicorn的操作界面
2、准备工作溶液和样品
所有的工作溶液和样品需要经过0.45μm的滤膜过滤，样品也可高速离心后取上清备用。当缓冲液中含有有机溶剂（如乙腈、甲醇），需在使用前用低频超声脱气10min。
3、清洗及管道准备
首先将a泵的进液管道（a1）放入缓冲液或平衡液中，将b泵的进液管道(b1)放入高盐溶液中，在system control窗口点击工具栏内的manual，选择 pump→pump wash explorer，选中a1,b1管道为on， execute。泵清洗将自动结束。(fig 4)
fig 4、akta explorer的泵清洗操作
4、安装层析柱
在manual里选择pump→flow rate，输入一定的低流速（fig 5），insert；选择alarm&mon→alarm pressure，设置high alarm（输入填料或层析柱的耐受压力，以较低者为设置值，具体可在填料说明书或层析柱说明书中查到），insert，execute（fig 6） 。待injectionvalve的1号位管道流出水后接入柱子的柱头，稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉接入管道连上紫外流动池。
fig 5、akta explorer的流速设定操作
fig 6、akta explorer的限压设定操作
5、开始纯化：
1）在柱子平衡好之后（电导，ph的数值和变化趋势稳定）即开始上样了。此时应将紫外调零（fig 7），选择alarm&mon→autozero，exectue。
fig 7、akta explorer的紫外调零操作
2）具体上样方式：akta系统的上样方式比较灵活，可以根据具体样品的条件进行上样，包括用样品环上样、用系统泵上样、用样品泵上样等，这里以用系统泵上样为例简单介绍上样过程。点击pause，将a1放入样品中，点击countine，待样品上完后，再将a1放入到平衡液中继续清洗柱子。
3）洗脱：上样后用缓冲液尽量将穿透峰洗回基线。在manual里选择pump→gradient，
按照自己的工艺选择targetb（100％）和length（10cv）（fig 8）。
fig 8、akta explorer的洗脱条件设定操作
4）设定收集：选择frac→fractionation_900,输入每管收集体积，exectue（fig 9）。结束固定体积收集选择frac→fractionation_stop_900，exectue（fig 10）
fig 9、akta explorer的组分收集设定操作
fig 10、akta explorer的组分收集停止设定操作
5）清洗泵及卸下层析柱：
将a1和b1入口放入纯水中，启动pump wash purifier功能冲洗a泵和b泵及整个管路。然后再将a1和b1入口放入20％乙醇中，同样操作将乙醇冲满整个管路保存。再给柱子一个慢流速，设置系统保护压力，然后先拆柱子的下端，正在滴水的时候将堵头拧上，再拆柱子的上端，再拧上上端的堵头。整个过程中应防止气泡进入。
6）关闭电源：
从软件控制系统的开始一个窗口unicorn manager点击退出，其他窗口不能单独关闭。然后关闭akta主机电源，关闭电脑电源。
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