茎尖培养

发布时间:2024-03-12
兰花茎尖培养多从生长的植株上切取3~20毫米的茎,去掉苞片,用水冲洗干净后,放入75%酒精中浸泡数秒,取出,转入加有吐温-20的漂白粉清液中浸泡约10分钟,再用无菌水冲洗2~3次,置消毒滤纸中吸干水分。然后在无菌条件下,用解剖刀将外表的幼叶剥掉,切取0.5~0.8毫米大小的芽,接种在固体培养基上,保持室温23~24c,并给予1500~2000勒克斯、每天12~14小时的光照,诱导原球茎发生。常用的培养基为ms和bs培养基。培养基中一般不使用2,4-二氯苯氧乙酸,而常加人10%的椰子汁、带乙酸0.5~1.0毫克/升和6-苄基嘌呤0.1~1.0毫克/升。有条件的单位,应尽量使用液体振荡培养,水平振荡可快些,而立体振荡应慢些,一般每分钟2次即可。若无振荡设备,可手动每天振荡2~3次。振荡不仅有利于原球茎球状体形成,也有冲洗周围组织的作用,防止组织的老化与枯死。通常在接种后不久,生长点组织先呈绿色,接着生长茎叶,以后在生长点基部的组织开始肥大,形成原球茎。原球茎可以不断分割继代培养,加速繁殖,直至达到所需的个数为止,然后再转入分化培养。此时培养基中离子浓度应调低些,约15~20毫克/升较好,或在分化培养基中加人椰子汁等天然物质,原球茎便会很快再生成植株。而再分化的个体必须移人大的培养器内,继续培养3~6个月,直至小苗有3~4片叶、3~4条根、高3~10厘米时才能移出,并将根部琼脂清洗干净后,栽入泥炭或蛭石中,但要注意保湿和弱光,并定期浇水施肥,促进生长。
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