透明质酸(HA)elisa定量检测试剂盒的操作步骤

发布时间:2024-03-07
透明质酸(ha)elisa检测试剂盒等抚生生物elisa试剂盒间接法简单操作步骤:
(1)、将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原;
(2)、加稀释的受检血清,保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗-体复合物;
(3)、加酶标抗抗体;
(4)、加入酶促反应底物,发生显色反应,显色的深浅与待测抗体的量成正比。
透明质酸(ha)elisa检测试剂盒操作步骤:
1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl,待测样品孔中先加样品稀释液40µl,然后再加待测样品10µl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
2、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
4、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。
6、显色:每孔先加入显色剂a50µl,再加入显色剂b50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10 分钟.
7、终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(od值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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