茶碱、咯利普兰和acetamide—45对gl62酵母细胞表达的人磷酸二酯酶4a的抑制作用

发布时间：2024-02-29

目的：研究gl62酵母细胞中磷酸二酯酶4a（pde4a）的诱导表达和茶碱、咯利普兰、n－对氟苄基－3－[(n-4-吡啶）－乙酰胺]-吲哚45（acetamide-45)对gl62酶母细胞诱导提取物中pde4a活性的抑制作用。方法：克隆了人pde4a基因的gl62酵母细胞在cuso4 150μmol/l条件下诱导表达pde4a并提取，用高效液相色谱法测定pde4a的活性。结果：gl62酵母细胞在cuso4诱导下的表达产物蛋白分子在62kda和83kda之间，表达产物的pde4a的活性在3h达到最大为（188±23）μmol·g^-1·min^-1，其米氏常数km为（17．7±2．6）μmol·l^-1.茶碱，咯利普兰和acetamide-45对诱导提取物pde4a活性的ic50（95％可信限）分别为1642（989－2727），4．58（3．45－6．08）和275（170－444）μmol·l^-1。结论：gl62酵母细胞经cuso4诱导可表达pde4a，茶碱、咯利普兰和acetamide-45能抑制其活性，gl62酵母细胞的诱导表达提取物可用来研究pde4a及其抑制剂。完成机构：浙江大学医学院国家药品监督管理局呼吸药物研究实验室，杭州310031，中国