细胞培养常用试剂的配制如下:
一.pbs 磷酸缓冲盐溶液(一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用)
pbs 1l配方ph7.4:磷酸二氢钾(kh2po4):0.27g, 磷酸氢二钠(na2hpo4):1.42g, 氯hua钠(nacl):8g, 氯hua钾(kcl):0.2g, 加去离子水约800ml充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调ph至7.4,zui后定容到1l 高温高压灭菌后置于4摄氏度冰箱保存待用。 (一般情况下,现配现用,易变质暴露在空气中)
二.细胞消化液
0.25%胰酶-0.02%edta的配制 配方:100ml pbs,0.25g胰酶 步骤:1先配100mlpbs 2称胰酶0.25g 3加入pbs中,低速搅拌 〈4h冰浴中,或者4℃过夜低速搅拌0.5h冰浴中(储存-20摄氏度冰箱中,使用保存4摄氏度) 4调ph7.4 5仍在冰浴中 6过滤,分装,-20℃保存,4℃短期内用完 tip:低速很重要,机械搅拌对酶是一种冲击,如果起沫,酶就变性了。低温,防止酶失活。对难消化的细胞:在上述配方中,加入0.02g的edta(0.02%) tip:因为edta可以络合ca2 ,增加消化效力。
三.细胞培养基
人脐静脉内皮细胞huvec细胞 培养基rpmi 1640 培养基/dmem培养基肝癌细胞hepg-2细胞培养基 dmem培养液(含100 u/ml-青霉素、100 u/ml链霉素、10%新生牛血清)
以上为细胞培养过程中zui常用的几种试剂,如果您想节省时间并提率,sciencell研究实验室提供了整套的细胞培养基添加物和其它细胞培养试剂,这些试剂符合高品质的工业标准。我们还提供各种细胞转染试剂,针对不同类型的细胞,全面优化,提高转染效率,同时提供细胞培养所需要的细胞外基质成分重组蛋白。您的实验是否需要经美国农业部认证的胎牛血清、胰蛋白酶/edta、无酶的解离液和更多相关试剂?这些我们均可提供,并经过全面测试,保证您的细胞达到*生长状态。