通过优化影响茶树issr.pcr的主要参数,确立了适用于茶树的issr反应体系和扩增条件。结果表明在20μl反应体系中,模板dna、引物、mg^++、dntp和taqdna聚合酶五种主要成分的最适浓度分别为10ng、150nmol/l、1.5mmol/l、150gmol/l、0.5u。在扩增过程中,引物的适宜退火温度比其tm值平均高4.5℃,扩增出足量产物至少需要30个热循环。利用该优化反应体系和扩增条件,对13份不同茶树种质资源进行issr-pcr扩增,扩增产物的多态性为77.6%。引物tri18构建的issr指纹图谱,可以区分13份茶树资源中的12份,分辨率达92.3%。完成机构:中国农业科学院茶叶研究所,农业部茶叶化学工程重点实验室,浙江杭州310008