山茶花叶片dna提取及rapd反应体系的研究

发布时间:2023-08-20
山茶花(camellia japonica l.)是我国特产的名贵花卉之一,由于其品种繁多,在系统分类和品种鉴定上存在一定的难度.本研究针对山茶花的dna提取方法和rapd扩增体系进行了摸索,旨在为山茶花在dna水平的分类鉴定和分子生物学方面研究打下一定的基础.实验采用改进的ctab法提取山茶花叶片dna,得到的dna纯度较高,od260/od230值为1.90~2.0,od260/od280值为1.80~1.83,得率也较高,一般在150~200μg·g-1左右,片段完整性较好,大于20kb,符合分子遗传实验的要求;在山茶花rapd扩增条件的研究中,发现20μl反应体系中加入100ng dna、125 μmol·l-1dntp(each)、1.2μmol·l-1mg2+、1×buffer、0.5μmol·l-1引物、1 u taq酶最为合适,退火温度一般设为37℃左右,扩增产物的电泳条带数多、清晰、明亮.完成机构:浙江师范大学化学与生命科学学院,金华,321004
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