如何捕捉弱荧光下的显微镜图像--同舟同德专业荧光显微镜
如何捕捉弱荧光下的显微镜图像--同舟同德专业荧光显微镜
如何在弱荧光条件下获取显微图像,一直是厂家和图像采集装置制造者一直在努力探求改善的课题。有越来越多的方法出现来改善这一状况:
1)首先,应该选取高质量的荧光显微镜,和适用于不同荧光光谱的荧光物镜;
2)清洗干净的样品载体(如载玻片、盖玻片等),消除不必要的杂荧光干扰;
3)尽量完善的样品制备;
4)选取合适的激发光源;
5)选取高敏感度和大动态范围的ccd,当然也可能是emccd之类的;
在上述条件的基础上,数码摄像头的调整可以适当增加增益,但小心因之而引起的信噪比下降,还可以用过滤的方法尽量消除噪音信号。另外,想要降低数码摄像头的分辨率还可以使用bin,很多使用者在拍摄荧光图像时,也使用很高的分辨率,在通常情况下是得不偿失的。
6)我们还可以通过增加曝光时间来达到这一目的,当然要注意时间延长对样品的淬灭影响,如果可以,可以用一些抗淬灭剂;
7)当然降低拍摄环境光线的干扰(背景光)也是非常重要的。
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