SRM 1950血浆中组成成分的分析方法

发布时间:2024-07-30
胆固.醇、脂肪酸和甘油的分析方法:
srm 1950血浆采用nist同位素稀释(id)气相色谱质谱(id-gc-ms)确定法测定胆固.醇质量分数[7.8]。该方法是根据堕.胎医学可追溯性联合委员会(jctlm)[9]批准的高阶参考测量方法。该方法用乙醇中氢氧化钾(koh)水解胆固.醇酯,然后用己烷萃取,再用双(三甲基硅烷基)乙酰胺衍生化胆固.醇,以胆固.醇-25,26,27-c为内标。表1列出了认证的值。
总甘油的质量浓度(如三油酸)的值分配是基于nist id-gc-ms权.威方法[10]。该方法被jctlm认为是一种高阶参考测量方法.方法包括用乙醇koh水解甘油三酯,去离子化,在吡啶中与丁基硼酸发生反应,并以n-methy-n-三甲基甲硅烷基三氟乙.酰胺1,2,3-1c;衍生化为内标,总甘油的认证值列于表1。
脂肪酸的测定(nist):
srm 1950血浆采用两种不同的萃取方法和两种分析方法(标准值为sce 表2,参考值为表3)测定了srm 1950中脂肪酸的质量分数。第二组用甲醇中的氧化钠处理,然后用三氟.化硼[11]。用火焰离子化检测(fid)和气相色谱-质谱(gc-ms)对两组样品进行气相色谱分析。采用0.25 mm×100 m双氰丙基聚硅氧烷(fid)为色谱柱,采用含50%氰基丙基聚硅氧烷(摩尔分数)的0.25mm×60m熔融石英毛细管柱进行气相色谱-质谱。
脂肪酸的测定:
在langerstedt方法[12]的基础上,srm 1950血浆采用id-gc-ms法测定了总脂肪酸[12](标准值见表2,参考值见表3)。该过程是以胆.固醇酯、甘油三酯和磷脂为原料,在热存在下,用量子化学加成:盐酸和甲醇:羟基化钠水解脂肪酸。“总脂肪酸在毛细管柱(30m×0.25 mm×0.25)上以五氟苄基溴(pfb)萃取、浓缩、衍生,再用10种同位素标记的内标标准重新构成24种脂肪酸werc。负化学电离导致脂肪酸-pfb酯的碎裂,在毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25)上形成一个以氦为载体的阴离子。
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