cellsorter荧光激活高速自动细胞分选系统
-细胞拣选程序
cellsorter荧光激活高速自动细胞分选系统使用了玻璃微量移液器，该微量移液器由安装在电动倒置显微镜物镜上的控制台固定。这种带有适当软件的显微镜附件可通过计算机视觉控制自动进行单细胞操作。微量移液器的垂直定位精度取决于物镜的景深和显微镜的精细聚焦驱动。使用软件校准，微量移液器的水平定位与显微镜的光学分辨率和2d电动显微镜载物台的精度一样精确。
对在35毫米培养皿中培养的活的粘附哺乳动物细胞进行了分类拣选，这些细胞要么在通过硅烷化作用制成亲水性的聚二甲基硅氧烷（pdms）薄层上，要么在裸露的玻璃上。用数码相机捕获培养物的相衬和荧光显微镜图像。用2d电动载物台扫描大面积的培养皿。软件可以识别相衬和荧光镶嵌图像中的细胞，这些图像是从相邻的显微镜区域合并而来的。
沿着行进的salesman算法计算出的路径，一对一地访问选定的荧光细胞，然后通过计算机控制的微量移液器将其拾取。为避免碰撞，微量移液器在两个细胞之间，距离表面100毫米, 通过定位拾取细胞.
使用2d电动载物台，将下一个细胞恰好位于微量移液器孔的下方。微量移液器的上端连接到一个塑料管，该塑料管通向一个高速电磁液体阀。阀的另一个端口连接到由*控制的注射器。在分选细胞之前，将微量移液器和试管装满去离子水。在拾取一个细胞培养基之前，将其放入微量移液器中，以避免细胞的渗透性休克。使用聚焦驱动器，将附着在物镜上的微量移液管降低到表面附近，然后打开流体阀并拾取细胞。
正在工作的细胞分选微量移液器
显示了从电动显微镜载物台上放置的35 mm培养皿中收集40个细胞时的微量移液器。单个阀的拾取过程伴随着液阀打开8ms的敲击声。
应用了短的8 ms可用瓣膜打开脉冲，以减少抽吸体积和去除邻近细胞的机会。柔软的pdms涂层可确保安全接近或用微量移液器接触表面。