小尾寒羊增食欲素(orexin)elisa检测试剂盒操作步骤：
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/l，120 ng/l ，60 ng/l，30 ng/，15 ng/l）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48t的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48t的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂a50μl，再加入显色剂b50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（od值）。 测定应在加终止液后15分钟。
小鼠b淋巴细胞刺激因子(mouse baff)
小鼠凋亡因子bax(mouse bax)
小鼠细胞凋亡相关基因(mouse bcl-2)
小鼠脑衍化神经营养因子(mouse bdnf)
小鼠脑衍化神经营养因子受体(mouse bdnf r)
小鼠骨成型蛋白-2(mouse bmp-2)
小鼠骨成型蛋白-4(mouse bmp-4)
小鼠骨成型蛋白受体1a(mouse bmp-r1a)
小鼠骨成型蛋白受体ⅱ(mouse bmp-r2)
小鼠脑钠肽(mouse bnp)
小鼠n端前脑钠素(mouse nt-probnp)
小鼠骨唾液酸蛋白(mouse bsp)
小鼠cxcl3(mouse cxcl-3)
小鼠cxcr4(mouse cxcr-4)
小鼠皮质酮(mouse corticosterone)
小鼠环氧化酶-2 (mouse cox-2)
小鼠结缔组织生长因子(mouse ctgf)