hplc分析中，在se谱柱正常，样品灵敏度足够，分析方法合适，se谱峰在出峰时间较短的条件下（不包括梯度），峰型应对称而尖锐。但是，在对样品了解程度不够，方法不妥，样品处理方法及进样方式不合理下，会出现各种意想不到的问题，而对se谱峰难以作出合理的解释，尤其对于新手更是如此。下面根据本人几年工作的体会，提出一些看法，向同仁指教。se谱双峰指的是明是一种物质，但在se谱图中出现双峰，而表明含二种物质。我将这种情况分为四种原因。
1se谱柱如果你分析样品时发现每个se谱峰都双峰出现（出峰越快，双峰的可能性会减少），尤其采用单一纯物质时，可以肯定se谱柱出问题－柱头受损或柱头固定相变脏或流失。如果进样量少，原来se谱柱正常，色谱峰的形状多为一da峰带一小峰，不一定拖尾，这一般应是柱头受堵，将色谱柱反过来接，用流动相冲洗或酸洗或其它溶剂，将堵在柱头的残留物冲掉，再反过来，一般情况下就行了。当然不反冲，正冲有时也会正常的。如果峰拖尾，双峰强弱相差不da，柱头固定相变脏或流失可能性更da，这是可以将进样那头拧开，将微孔滤片超声，柱头刮去一部分填料，重新填上新填料拧紧，不过这种活，需要一定技术，同时不能老干那种事，否则用不了几次，色谱柱就会应柱效很低而报废。
2溶剂极性及进样量许多hplc分析者对此可能不以为然，一般的hplc的书籍和文献都不会提到这方面的内容，而这确是双峰产生的一个很重要的原因。目前hplc分析多为反相se谱，流动相多为甲醇、乙腈、水，加各种添加剂以改善分离性能。样品一般用与流动相相溶的溶剂溶解。溶解方法是用流动相溶解，但是很多情况是不一致的。当用溶剂极性强度da的试剂，如纯甲醇、纯乙腈，纯乙醇，而分析体系中以水为主，样品进样量da，如定量管为20ul，此条件下*可以肯定，单一的纯物质出双峰，第二峰比第—峰小（每次都不太一样），且拖尾，保留时间会提前（相对进样量少而言），将进样量减少一半以上，峰型将变为正常。这是样品的溶剂与流动相极性相差太da，而流动相来不及将其稀释达到平衡造成的。上面提到进样量造成双峰的一个原因，另一个原因是，进样量不一定大，但量很大，se谱图上的双峰紧靠在一起，基本上齐高，不拖尾（如果出峰很快，也可能是se谱柱问题）。将样品稀释再进样就可以了，这是由于进样量过大，se谱柱过载造成的。
3样品的特性有些样品由于其化学结构的特点，存在互变异构现象，而这种互变异构体无法分开，而是以一个动态平衡存在。在se谱分析时，在一个特定的条件下，一种物质将出现双峰，双峰靠的很近，基本齐高，不拖尾，条件稍一变化，尤其ph，双峰现象将消失，如*等。有的样品紫外的se谱图上看不到双峰，但在lc－ms下，用质谱检测器，其质谱的总离子流图上较明显，例如我分析过的农药啶虫眯（吡虫清）。
4参数记录的参数一般都内定的，不必修改，但gc和hplc的参数是不*一致的，例如c－r3a数据记录仪上的一般记录时间间隔gc为2ms，hplc为5ms，如果记录间隔时间缩短，一个峰将变为二个峰或更多。