实验室仪器-色谱柱分类及选购方法

发布时间:2024-07-25
色谱柱技术发展促进了高效液相色谱法在药物分析中更为广泛的应用。高效液相色谱法(hplc)已成为药物分析,特别是多组分分析和杂质控制中重要、广泛的分析技术之一。由于色谱柱是液相色谱分离的核心,开发新型或高性能的高效液相色谱填料(又称为填充剂、固定相),提供多种色谱柱类型一直是色谱研究中丰富、有活力、富于创造性的内容。下面,我们来看看实验室仪器-色谱柱分类及选购方法。
如今,色谱柱技术的不断改进创新,填料种类的日益丰富,分离模式和分离方法的逐步完善,为分离分析科学描绘了一幅幅绚丽的图景新颁布的2015 年版《中国药典》自2015 年12月1 日起正式实施。新版药典的变化是将原来各部的附录整合成了第四部,形成通则并对通则制定了更为合理的编码,液相色谱法列于2015 年版《中国药典》(四部)中通则0512 中。
在色谱分析中,如何选择的色谱条件以实现理想的分离,是色谱工作者的重要工作。色谱是一种分离分析的手段,分离是核心,因此可以说担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。因此选择一个合适的色谱柱非常重要。
色谱柱可分正相模式色谱柱、反相模式色谱柱和亲水模式柱:
正相模式色谱柱:采用极性固定相(如乙二醇、氨基与腈基等键合相);常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)。
反相模式色谱柱:一般用非极性固定相,以硅胶为基质键合不同的基团(如c18、c8);适用于分离非极性和极性较弱的化合物。反相色谱(rpc)在现代液相色谱中应用多,据统计它占整个hplc应用的80%左右。由于超临界色谱的崛起,一些过去用正相色谱的实验逐渐被超临界色谱所代替,所以反相色谱柱的应用将会更加广泛。随着色谱柱填料的快速发展,某些无机样品或易解离样品的分析也可用反相色谱法。为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲盐控制流动相的ph 值。硅胶基质键合相(c8和c18)色谱柱使用的ph 值通常为2.5~7.5(2~8),太高的ph 值会使硅胶溶解,太低的ph 值会使键合的烷基脱落。近年来技术的更新,利用包被、空间位阻、杂化颗粒等新技术,已经可以使硅胶基质的色谱柱使用范围扩大到ph 为1~12,流动相为较强酸性或碱性时,可选择宽ph 值的色谱柱。
亲水(hilic)模式:hilic不同于反相色谱技术,流动相为反相色谱的流动相,它提供了相对于反相的互补选择性,通常可保留传统反相色谱方法无法保留的高极性化合物。需要注意的是hilic模式中硅胶基质无键合相的色谱柱,流动相ph 适用范围。
对色谱柱的基础要求是:柱效高、选择性好,分析速度快等。目前市售的用于hplc的各种色谱柱种类繁多,从色谱柱填料来分,可分为硅胶基质和有机杂化球基质的色谱柱,还有不同长短、不同微粒大小的色谱柱。
色谱柱的选择可根据待分析样品的极性、分子量大小、是否可溶于水等因素来考虑。如样品分子量大于2000的,可溶于水的,可选择凝胶色谱柱、大孔径反相色谱柱、大孔径离子交换色谱柱。分子量小于2000的,溶于有机相的,可选择正相模式色谱柱。溶于水,可电离的样品可选择反相模式色谱柱或离子交换或未经涂渍亲水模式的色谱柱等。
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关键词:色谱柱 玻璃器皿
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