山茶issr扩增条件的优化

发布时间:2024-07-20
以山茶基因组dna为材料,测试山茶issr扩增的最适退火温度,并采用单因素试验,测试了模板dna量,mg^2+浓度,dntp浓度,bsa浓度,引物用量,taq酶用量等6个因素对山茶issr扩增的影响。结果显示:山茶issr扩增的最适退火温度为56.3℃;适宜的扩增体系为:10μl pcr反应体积中,1×taq酶配套缓冲液(10 mmol·l^-1tris.hcl ph 9.0,50mmol·l^-1kcl,0.1%triton x-100),2 mmol·l^-1mgcl2,0.6 mmol·l^-14×dntp,2 mg·ml^-1bsa,16 ng模板dna,10 pmol引物,0.5 u taq酶。完成机构:[1]北京林业大学自然保护区学院,北京100083 [2]台州学院生态研究所,浙江临海317000 [3]台州市农业科学研究院,浙江临海317000
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