1、预处理：新超滤管：使用前用纯水浸泡，冰箱预冷10 min。然后将水倒出，置于冰上预冷2-5 min，加样。旧超滤管：倒出管内的乙醇浸泡液，用纯水冲洗干净10遍（注意水流速尽量平缓，防止冲破滤膜），置于冰上预冷2-5 min，加样。2、加样：如超滤管中有少许残留水可将超滤管内管倒置1000×g离心1 min，移液枪移取适量样本加入超滤管中。3、离心：配平，12000 ×g离心（15-30 min），等达到目的转速后方可离开。4、样本收集 ：外管滤液为除去部分蛋白的样本上清，如需取浓缩后样本用于其他实验，则另取外管，内管倒置，1000×g离心1-2 min。5、超滤管清洗使用完的超滤管用纯水反复清洗5次，再用75%乙醇冲洗3次。